sermina lieu phap gen human gene therapy

LINK DOWNLOAD MIỄN PHÍ TÀI LIỆU "sermina lieu phap gen human gene therapy": http://123doc.vn/document/562953-sermina-lieu-phap-gen-human-gene-therapy.htm

Theo Tổ chức Y tế thế giới và quy định của nhiều
quốc gia thì điều trị bằng liệu pháp gen cần tuân thủ
một số nguyên tắc sau:
- Theo dõi và hiểu biết cặn kẽ quá trình, cơ chế phát
sinh bệnh, đặc tính di truyền của bệnh.
- Nắm vững cấu trúc và chức năng của gen gây bệnh,
gen hỏng, gen đột biến,…cấu trúc, chức năng của gen
liệu pháp dùng để thay thế.
- Dự đoán hiệu quả của liệu pháp. Nếu hiệu quả cao
mới áp dụng.
- Cần thử nghiệm nhiều lần đối với động vật rồi mới áp
dụng cho con người.
1.2. Nguyên tắc cơ bản của điều trị bằng liệu
pháp gen
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 5
2. Phân loại liệu pháp gen
- Liệu pháp gen có hai nhóm phương pháp cơ
bản:
+ Liệu pháp gen soma: là phương pháp điều trị
thay thế hay sửa chữa gen hỏng, gen bệnh của
các tế bào soma trong cơ thể người, giúp cho
con người sống bình thường. Các tế bào dùng
để chữa trị có thể là tế bào lympho, tế bào gan,
đặc biệt là dùng tế bào gốc.
+ Liệu pháp gen tế bào mầm: là phương pháp
điều trị, sửa chữa, thay thế gen hỏng cho các
giao tử (tinh trùng, trứng) nhằm tạo ra thế hệ
sau bình thường.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 6
3. Các kỹ thuật cơ bản của liệu pháp gen.
3.1. Cơ sở của liệu pháp gen.
Để chuyển gen, cần hội đủ một số điều kiện
sau đây:
- Đầu tiên, phải có bản sao đầy đủ của gen
thích hợp với những trình tự điều hoà thích
hợp (trình tự khởi động).
- Thứ hai, phải lựa chọn kỹ thuật đích.
- Thứ ba, có hai phương pháp ứng dụng liệu
pháp gen:
+ Ứng dụng trực tiếp với bệnh nhân.
+ Ứng dụng trên các tế bào đã tách ra khỏi
người bệnh sau đó cấy trở lại người bệnh.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 7
3.2. Các bước cơ bản trong liệu pháp gen.
Trong thực nghiệm, người ta dùng các vector virus
để chuyển các gen vào tế bào động vật theo các bước:
-
Bước 1: Tạo vector tái tổ hợp mang gen cần chuyển.
Sau đó, vector tái tổ hợp được đưa vào tế bào nuôi cấy
(Tế bào tủy xương).
-
Bước 2: Vector virus mang gen lành được đưa vào cơ
thể mà từ đó người ta đã tách các tế bào tuỷ xương.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 8
3.3. Kỹ thuật chuyển gen liệu pháp.
Khi tạo ra các vector liệu pháp gen, cần
phải có kỹ thuật chuyển các gen liệu pháp
vào tế bào, hoặc cơ thể người.
Mục đích cuối cùng là các gen liệu pháp
trong cơ thể người phải được phiên mã, dịch
mã tạo ra các protein liệu pháp có tác dụng
chữa bệnh.
Các vector liệu pháp được sử dụng khác
nhau, thích hợp cho từng loại tế bào đích,
nhằm tạo ra các protein liệu pháp nội bào,
hoặc ngoại bào.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 9
Hình thức chuyển gen có thể được thao tác
thông qua một số cách sau:
Chuyển trực tiếp gen
vào mô người bệnh (liệu
pháp in vivo), gồm các bước
sau:
- Lựa chọn vector liệu pháp
thích hợp.
- Tách và tạo vector tái tổ
hợp mang gen liệu pháp,
thường thì tạo vector virus
để chuyển hiệu quả.
- Đưa vector tái tổ hợp mang
gen liệu pháp bằng các kỹ
thuật chuyển gen như: vi
tiêm, súng bắn gen v.v…
- Kiểm tra biểu hiện của gen
liệu pháp.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 10
Chuyển gen vào tế bào bên ngoài người
bệnh (liệu pháp ex vivo):
- Là cách lấy tế bào bị
bệnh có gen hỏng ra
ngoài cơ thể
- Dùng các kỹ thuật
khác nhau để chuyển
gen lành vào thay thế
các gen hỏng để tạo tế
bào lành
- Nhân nuôi tế bào
lành lên thành số
lượng lớn rồi đưa vào
cơ thể người bệnh. Có
thể dùng súng bắn
gen, vi tiêm.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 11
Về kỹ thuật chuyển gen liệu pháp để điều trị
bệnh, có thể dùng các kỹ thuật chính sau:
•
Kỹ thuật vi tiêm
(Microinjection):
Được sử dụng để đưa
vector liệu pháp vào các
khối ung thư. Gen liệu
pháp có thể là các gen
tổng hợp các chất ức
chế sự phát triển khối u.
Có thể dùng cả 2 hình
thức in vivo hoặc ex
vivo.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 12
Kỹ thuật xung điện (electroporation):
Thường dùng khi
đưa gen liệu pháp
vào tế bào nằm
ngoài cơ thể sống.
Nhờ kỹ thuật xung
điện có thể thay thế
gen hỏng bằng gen
lành, sau đó nhân
nuôi tế bào lành tạo
số lượng lớn, rồi
chuyển vào người
bệnh.
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 13
Kỹ thuật bắn
gen nhờ súng bắn
gen để chuyển
gen liệu pháp vào
tế bào đích
thường đạt kết
quả cao. Thực
hiện kỹ thuật này
cần có thiết bị bắn
gen, các vi đạn có
bọc gen liệu pháp
để đưa vào tế bào
đích
Kỹ thuật dùng súng bắn gen (gene gun):
nguyenthanhloi_2@yahoo.com 14