Thứ Sáu, 24 tháng 1, 2014

Nghiên cứu đặc điểm hóa sinh vì phân lập gen chaperonin liên quan đến tính chịu hạn của một số giống đậu tương địa phươngtrồng ở vùng tây nguyên

3
Chng 1
NG QUAN TÀI LIU
1.1. CÂY U TNG
1.1.1. c m sinh hc ca cây u tng
u tng có tên khoa hc là Glycine max (L) Merrill, có b nhim sc th
2n = 40, thuc thân tho, hu (Fabaceae), h ph cánh bm (Papilionoidea).
u tng có ngun gc t các tnh phía Bc và ông Bc Trung Quc, các vùng
k cn ca Cng hòa liên bang Nga, Triu Tiên và Nht Bn.Các ging u tng
ang trng ti nc ta c du nhp t Trung Quc t lâu i [13].
V hình thái, cây u tng các b phn chính là r, thân, lá, hoa và qu
Ru tng có r cc gm r cái và r bên, trên b r ca cây u tng có
nhiu nt sn cha vi khun Rhizobium japonicum có kh nng cnh nit t khí
tri cung cp m cho cây, có vai trò ci to t [9].
Thân u tng có hình tròn, thân non có màu xanh hoc tím, khi qu chín
thì thân ng sang màu vàng nâu.
Lá u tng gm 3 loi lá: lá mm, lá n và lá kép (có 3 lá chét ôi khi có
4-5 lá chét).
Hoa mc thành chùm  nách lá, mi chùm hoa có t 10-15 hoa, có màu trng
hoc tím, hoa u tng t th phn hoàn toàn. Qu có th thng hoc cong có
nhiu lông, mi qu cha t 1-5 ht nhng thông thng là 2-3 ht.
Ht u tng không có ni nh mà ch có mt lp v bao quanh phôi và 2 lá
mm. Ht có hình tròn hoc hình bu dc, tròn dài, tròn dt, v ht u tng có màu
nâu, en, vàng, xanh. Khi lng ht rt a dng t 20-400 mg/ht
n c vào thi gian sinh trng ca cây u tng ngi ta chia làm 3 loi:
Ging chín sm (75-85 ngày), ging chín trung bình (80-100 ngày), và ging chín
mun (110-120 ngày). Thi gian sinh trng là mt yu t quan trng  la chn
cây trng luân canh tng v [28].
4
1.1.2. Giá tr kinh t ca cây u tng
u tng là cây trng có giá tr kinh t cao, là cây công nghip, cây thc
phm, va là cây ci ci to t. Vi u th ngn ngày, trng c nhiu v trong
m, có th trng thun, trng xen, luân canh gi v, trng c nhiu vùng sinh
thái khác nhau, vì vy sau lúa và ngô, cây u tng có mt vai trò c bit quan
trng trong nn nông nghip nhit i.
V mt dinh dng, ht u tng có thành phn dinh dng cao cha 30-
56% protein, 12-25% lipit và 20% gluxit [20], là ngun axit amin, vitamin (B1, B2,
C, D, E) rt quan trng i vi i sng ca con ngi. Protein u tng còn có
tác dng hu hiu gim cholesterol trong máu, gim thiu nguy c các bnh liên
quan n tim mch, chúng cng ngn cn s phát trin các mm ung th, ngn nga
bnh thn, bnh tiu ng, bnh xp xng
Trong công nghip, sn phm t cây u tng c s dng rt a dng
nh dùng trc tip ht khô hoc ch bin thành u ph, ép thành du u tng,
làm bánh ko, sa u, nc gii khát, nc chm áp ng nhu cu m trong
khu phn n hàng ngày ca ngi cng nh gia súc.
 nhng quc gia phát trin, ngi ta còn dùng u tng vào các k ngh
khác nh bin ch cao su nhân to, mc in, sn, xà phòng, cht t nhân to, cht
nhiên liu lng, du làm trn trong k ngh hàng không.
Trong trng trt, cây u tng còn có tác dng ci to t, tng nng sut
các cây trng khác. u này có c là do hot ng cnh N
2
ca loài vi khun
Rhizobium cng sinh trên r cây. Nh kh nng cnh m nên sau mi v thu
hoch thành phn hóa tính ca t trng c ci thin rõ rt, lng m trong t
tng và khu h vi sinh vt hiu khí trong t ng tng. Do ó, có li i vi cây
trng khác và sau khi thu hoch toàn b thân lá, r, lá ph li b mt t va có tác
dng che ph chng xói mòn, va là ngun hu c giàu m ci to t.
1.1.3. Tình hình sn xut u tng trên th gii và  Vit Nam
Trên th gii (tính n tháng 4/ 2006), có 78 nc trng u tng vi din
tích là 91,3 triu ha; nng sut 22,9 t/ ha, sn lng t 236,1 triu tn. Các nc
sn xut u tng ng u th gii là: M, Brazil, Argentina và Trung Quc
chim khong 90-95% tng sn lng u tng trên toàn th gii [45].
5
Nh vy, có th thy u tng chim mt v trí quan trng trong nn kinh t
th gii không ch do c gieo trng trên din tích ln  78 nc, mà ht u tng
còn c s dng rng rãi  làm thc phm và nguyên liu cho công nghip.
Bng 1.1. Sn lng u tng ca mt s nc trên th gii niên v 2006 – 2007
(Theo Oil World); n v tính: triu tn
 Vit Nam, trong vòng hn 20 nm qua (t 1985- 2006) din tích, nng
sut và sn lng u tng ã không ngng tng, c bit trong nhng nm gn
ây:  th m 2000 din tích trng u tng là 124100 ha n nm 2005 tng lên
203600 ha, nng sut t t 12000 t/ha nm 2000 lên 14,300 t/ha nm 2005 và
sn lng t 147300 tn nm 2000 lên 290600 tn nm 2005 [21].
Th gii 236,1
M 86,8
Brazil 59,0
Argentina 47,2
Paraguay 6,5
Trung Quc 16,2
n  7,7
Canada 3,5
Ukraine 0,9
Liên bang Nga 0,7
Indonesia 0,8
Vit Nam 0,3
Thái Lan 0,2
Nigeria 0,4
Các nc khác 0,8
6
Bng 1.2: Din tích, nng sut, sn lng u tng c nc qua các nm
(Ngun: Tng cc Thng kê, 2006)
m
Ch tiêu
2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006
Din tích (1000 ha) 124,1 140,3 158,6 165,6 182,5 203,6 185,8
ng sut (t/ha) 12,0 12,4 13,0 13,3 13,3 14,3 13,9
Sn lng (1000 tn) 149,3 173,7 205,6 219,6 242,1 290,6 186,9
Hin nay cây u tng c trng  c 7 vùng nông nghip trên c nc,
do iu kin sinh thái ca mi vùng khác nhau nên có s khác bit khá rõ v din
tích trng, nng sut và sn lng [21].
Bng 1.3. Din tích, nng sut và sn lng u tng ca 7 vùng nm 2005
a m
Din tích
(1000 ha)
ng sut
(Kg/ha)
Sn lng
(1000 tn)
C nc 203,6 1430 291,5
ng bng Sông Hng 67,3 16000 107,5
Vùng ông Bc 48,4 1040 50,2
Vùng Tây Bc 25,0 1150 28,7
Vùng Bc Trung B 6,5 1220 7,9
Tây Nguyên 27,1 1570 42,5
ông Nam B 5,3 1060 5,6
ng bng Sông Cu long 21,2 2100 44,5
ng 3.1 cho thy Tây Nguyên là vùng có din tích trng u tng ln th
3 trong 7 vùng nông nghip trên  c.Cùng vi s ng trng a các loi cây
trng chính nh cao su, cà phê, h tiêu, ca cao….thì cây u tng ng ang c
chú trng và phát trin trên vùng t này.
Mc dù, sn lng u tng  nc ta có tng nhng so vi các nc trên
th gii và trong khu vc nng sut ca ta vn còn thp, và c bit trong nhng
m gn ây din tích, nng sut và sn lng u tng ca nc ta gim i áng
7
k. Nm 2005 din tích t 203600 ha gim xung ch còn 185800 ha nm 2006 và
sn lng gim t 290600 tn nm 2005 xung còn 186900 tn nm 2006.
Nguyên nhân chính là do u t thp, cha có b ging phù hp, cha áp
dng k tht tiên tin. Vì vy, nghiên cu ci tin các c m nông sinh hc ca
các ging a phng và to ging mi có nng sut cao, thích nghi vi u kin
sinh thái  nhng vùng khác nhau bng phng pháp truyn thng kt hp vi hin
i s áp ng c yêu cu ca thc tin t ra và ó cng là chin lc quan
trng v s phát trin cây u  nc ta.
1.1.4. Thành phn hóa sinh ht u tng
Trong ht u tng có các thành phn ã bit tính theo t l protein 30-
56%, lipit 12-25%, gluxit 20%; có các mui khoáng Ca, Fe, Mg, P, K, Na, S, các
vitamin A, B1, B2, D, E, F, các men, sáp, nha, cellulose. Ngoài ra, ht u tng
còn có  các axit amin c bn isoleucin, leucin, lysin, metionin, phenylalanin,
tryptophan, valin [20].
Protein là thành phn ch yu trong ht u tng. Chúng chim khong
30%-55% khi lng khô ca ht. Da vào h s lng, ngi ta chia protein ca ht
u tng thành 3 loi: 11S - legumin, 7S - vixilin, 2S - albumin. Nhng loi
protein chính trong ht u tng là: protein d tr (chim 70% tng s protein),
các enzim, các cht c ch proteaza và lectin. Thành phn ca protein gm có
albumin (9,5%), globulin tan trong nc (75,8%), globulin ch tan trong NaCl là
3%, glutelin - protein tan trong NaOH 0,2M là 11,7% [18], [25].
Thành phn axit amin ca ht u tng: Protein ca các loi u ,
nht là u tng, c xem là protein có cht lng tt nht trong các loi protein
thc vt. Chúng có cha tt c các axit amin không thay th. Hn na protein ca
cây hu còn có hàm lng lysin rt cao so vi protein t các loi ng cc.Tuy
vy, hàm lng các axit amin có cha gc SH (metionin, cystein) còn thp [8], [40].
Hàm lng lipit trong u tng khá cao chim khong 12-25% khi
ng khô, trong ó hàm lng các axit béo no thp, khong 13%, không có
cholesterol, 30% là các axit béo cha no mt ni ôi. Lng axit béo không no cn
8
thit: axit linoleic 50%, và c bit có 7% axit anpha linolenic là ngun cung cp
axit béo chui mch dài omega 3 quan trng cho c th nh DHA (Docosa
Hexaenoic Acid) và EPA (Eicosa Pentaenoic Acid ) [44].
Cht lng lipit ca ht u tng rt tt, cho nên nó c s dng rng rãi
trong công nghip ch bin thc phm. Ht u tng còn có các loi vitamin tan
trong lipit, c bit là vitamin E = 200 mg/100g lipit [8], ngoài ra trong ht u
ng còn cha mt s cht khác nh hydrat cacbon, mui khoáng, axit nucleic,
kích thích sinh trng .
Tóm li, ht u tng có giá tr dinh dng cao.Trong ó, hàm lng
protein d tr và cht lng ca chúng là yu t quyt nh làm cho u tng tr
thành ngun thc phm quan trng cho ngi và thc n cho gia súc [18].
1.2. NGHIÊN CU VC TÍNH CHU HN CA CÂY U TNG
1.2.1. Khái nim v hn và tác ng ca hn n thc vt
Hn i vi thc vt là khái nim dùng  ch s thiu nc do môi trng
gây nên trong sut quá trình hay tng giai n, làm nh hng n sinh trng và
phát trin ca cây.
Thiu nc trc tiên nh hng n s cân bng nc ca cây, tó nh
ng n chc nng sinh lý nh quang hp, hô hp dinh dng khoáng và cui
cùng nh n s sinh trng phát trin ca thc vt. Cây s cht non hoc gim sc
sng, gim nng sut [19].
Hin tng mt nc có th do tác ng s cp, là kt qu ca s thiu nc
trong môi trng, hoc là tác ng th cp c gây ra bi nhit  thp, st
nóng hay tác ng ca mui. Hn cng nh yu t ngoi cnh bt li khác khi tác
ng lên c th thc vt s gây ra phn ng ca c th. Tùy theo tng loài, ging
mà mc  phn ng ca c th cng nh thit hi do khô hn gây ra khác nhau:
mt s b cht, mt s b tn thng nhng cng có mt s khác không b nh
ng. Kh nng thc vt có th gim thiu mc tn thng do thiu ht nc gây
ra gi là tính chu hn [19].
9
Vit Nam là mt nc có a hình a dng và din bin khí hu phc tp, lng
a phân b không u gia các vùng, min và gia các thi k trong nm nên hn
hán có th xy ra  bt k mùa nào, vùng nào. Din tích có ti 3/4 lãnh th là i núi,
t canh tác ca các khu vc này thng xuyên b hn nên thành phn th nhng ca
các vùng khác nhau rt rõ rt. Tt c các yu t trên chi phi mnh m mc nc ngm
và kh nng gi nc ca t.  chng li khô hn cây có th gi không b mt
c, gim din tích lá, rút ngn chu k sng…Kh nng duy trì áp sut thm thu ni
bào có tác dng bo v hoc duy trì sc sng ca t bào cht khi b mt nc [2]. Có
hai loi hn do môi tng tác ng là hn t và hn không khí [1], [5].
Tác ng a n lên cây ch yu theo hai hng chính là: làm tng nhit 
cây và gây mt nc trong cây. Nc là yu t gii hn i vi cây trng, va là sn
phm khi u va là sn phm trung gian và cui cùng ca các quá trình chuyn hoá
sinh hc. Nc là môi trng  các phn ng trao i cht xy ra [2].
S tác ng ca hn, gây nên hin tng co nguyên sinh và làm cho cây b
héo. S co nguyên sinh các t bào din ra khi nng  nc trong môi trng quá
cao hay do hn nc làm cho nc trong t bào tht thoát ra ngoài nên khi.
Hn hán làm gim mnh quang hp. Khi hàm lng nc trong lá còn
khong 40-50% quang hp ca lá s bình tr cn tr s sinh trng ca cây.
Nh vy, nh hng cc oan ca hn  bt c giai n sinh trng nào ca
cây trng cng nh hng n các yu t cu thành nng sut và sn lng cây trng.
1.2.2. C s sinh lý, sinh hóa và sinh hc phân t ca tính chu hn
1.2.2.1. C s sinh lý, sinh hóa ca tính chu hn
Khi gp hn thc vt luôn có nhng bin i v mt sinh lý, sinh hóa nhm
không  mt nc. Có hai c ch bo v thc vt tn ti trên môi trng thiu
c ó là vai trò ca b r và kh nng u chnh áp sut thm thu [2].
Vai trò ca b r: kh nng thu nhn nc ch yu ph thuc vào b r. 
tránh mt nc nhng cây chu hn thng có b r khe, dài, mp, có sc xuyên
sâu s hút c nc  nhng ni sâu trong t hoc r lan rng vi s lng ln
[19]. Thc vt nói chung, và cây u tng nói riêng, khi  giai n cây non
thng chu tác ng mnh ca hn vì b r cha phát trin y  còn yu.
10
Kh nng u chnh áp sut thm thu (ASTT): là mt c tính quan trng
ca t bào khi b mt nc do nóng hn. Nhng thc vt tn ti trên môi trng mt
cân bng v áp sut thm thu òi hi phi có kh nng chng li u kin khc
nghit ó. Trong u kin khô hn ASTT c u chnh tng lên giúp cho t bào
thu nhn c nhng phân t nc tt. Bng c ch nh vy, thc vt có th vt
qua c tình trng hn cc b.
Thông thng, thiu nc gây ri lon toàn b phng thc chuyn hóa 
thc vt, làm tng hoc gim hàm lng các cht chuyn hóa nh: ng lên v hàm
ng prolin, nng  ion K
+
, các loi ng, axit hu c [2], [4], [30]. S tng
hp và tích ly các cht trên din ra rt nhanh khi t bào mt nc, các cht hòa tan
sc tích ly nhm chng li vic gim mt nc, tng kh nng gi nc ca
cht nguyên sinh và chúng có th tng tác vi lipit hoc protein màng ngn chn
s phá hy màng và các phc protein [24]. Quá trình này liên quan n s biu hin
ca các gen, hàng lot các gen nghc hot hóa tng hp to ra các cht cn thit
 chng li s khô hn [1].
c ta nm trong khu vc nhit i gió mùa hn là yu t tng xuyên tác
ng gây nh hng n sinh trng, phát trin ca cây trng, nh hng xu n
ng sut và phm cht ca chúng. Vì vy, vic nghiên cu các c ch chu hn s
là c s cho vic ci thin ging cng nh to ra c các ging có tính chng chu.
Khi nghiên cu v kh nng chng chu ca các cây trng ly ht ngi ta
thc hin theo nhiu hng khác nhau: phân tích hóa sinh trong ht ny mm 
nghiên cu a dng enzym - amylaza và proteaza hàm lng protein tan, thành
phn axit amim, prolin
Các proteazaóng vai trò quan trng trong c th sng và nht là trong thi
k ny mm ca ht. Chúng rt a dng. Thành phn phc tp ca các proteaza ht
c to ra bi sa dng chc nng do chúng m nhim trong thi k ny mm.
Proteaza nói chung không ch tham gia vào phân gii protein d tr trong ht, nhm
cung cp các axit amin cho thi k phát trin u tiên ca cây mà chúng còn tham gia
vào quá trình vi x lý phân t protein. Proteaza tham gia vào phân gii các protein l
11
hoc b bin tính khi gp u kin cc oan (lnh, mn, hn, tác ng c hc ) [18].
Trn Th Phng Liên (1999) khi nghiên cu so sánh phn di hot tính proteaza
ca các ging u tng chu nóng chu hn khác nhauã nhn xét rng. Proteaza
trong quá trình ht ny mm ca ht  tt c các ging u tng nghiên cu rt a
dng, có hot tính cao, có kh nng phân gii hoàn toàn protein d tr to nguyên
liu  tng hp protein cho c th mi. X lý nhit  cao chnh hng n hot
tính proteaza  mt s ging chu hn, không nh hng n ging chu nóng [18].
Nguyn Th Kim Dung (2003) nghiên cu s bin ng hot  proteaza  giai
on ht ny mm ca các ging lc ã rút ra kt lun, hot  ca proteaza trong
giai on ht ny mm có xu hng tng t 1 n 5 ngày tui, sau ó gim t 7 n
9 ngày tui [6]. Cng theo hng nghiên cu này Nguyn Th Thu Ngà (2007), cho
rng  các giai n ht ny mm làm bin i hot  ca proteaza và hàm lng
protein tan. S bin i này tuân theo quy lut chung : tng  các giai n t 3 n
7 ngày tui, bt u gim  giai n 9 ngày tui, hàm lng protein tan và hot 
proteaza có mi tng quan thun cht ch [29].
Nhng thay i hóa sinh khác do hn gây ra cng c nhiu tác gi quan
tâm nghiên cu: nh s thay i hàm lng prolin khi cây gp hn.
Prolin là mt axit amin có vai trò quan trng trong su hòa ASTT trong
t bào, ng thi là mt axit amin a nc có kh nng gi và ly nc cho t bào,
ngn chn s xâm nhp ca ion Na
+
tng tác vi protein màng, ngn chn s phá
hy ca màng và các phc protein khác. Các kt qu nghiên cu u cho thy khi cây
trng gp hn thì cây gim tng hp protein và tng tng hp prolin [26], [28].
Soulages và cs (2003) ã chng minh ngoài vai trò tng cng kh nng chu
hn thì chui axit amin L – Prolin nhóm II còn có kh nng chng li các tác ng
bt li ca nhit i vi cây u tng [ 38]. Theo inh Th Phòng (2001),  lúa
khi gây hn sinh lý bng dung dch sorbitol 5% hàm lng prolin ca các dòng chn
lc tng lên vt xa so vi i chng, s tng hàm lng prolin liên quan n kh
ng chu hn [30]. Kho sát cht lng ht và kh nng chu hn ca mt s ging
lúa cn a phng  vùng núi phía Bc, Chu Hoàng Mu và cs ( 2005) ã nhn xét,
12
kh nng chu hn ca các ging lúa cn có liên quan n hàm lng protein và hàm
ng prolin. Khi gp hn, cây lúa cn gim hàm lng protein và tng hàm lng
prolin [24]. Nguyn Th Thúy Hng ( 2006), khi nghiên cu v kh nng chu hn ca
các ging u tng a phng ca Tnh Sn La cng ã nhn xét rng: khi gp hn
các ging u tng có s gim tng hp protein và tng cng tng hp prolin [26 ].
1.2.2. C s phân t ca tính chu hn
Kh nng chng chu ca sinh vt nói chung và ca thc vt nói riêng liên
quan n cu trúc, chc nng ca các thành phn trong t bào và các quá trình
xy ra trong mi vùng liên quan n kh nng chu nóng, chu hn, mn, phèn
ca thc vt.
Phn ng ca thc vt trc nhng tác ng: nóng, hn rt a dng nó ph
thuc vào nhiu yu t khác nhau, trong ó có kiu gen,  dài và tính khc lit ca
iu kin ngoi cnh. Biu hin ca quá trình này là vic sinh tng hp mt lot các
cht trong t bào, mt s hormon hoc cht kích thích  giúp cho cây có kh nng
thích ng. Khi i sâu vào nghiên cu  mc  phân t ca hin tng nóng hn 
thc vt ngi ta ã có nhng bc tip cn khác nhau trên nhiu loài cây trng 
các giai on phát trin khác nhau. c nghiên cu nhiu nht là các protein sn
phm biu hin gen [19]. Nhóm các protein c c bit quan tâm bao gm:
protein sc nhit, môi gii phân t, LEA
Protein sc nhit (heat shock protein- HSP): HSP có  hu ht các loài
thc vt nh: lúa mì, mch, lúa go, ngô, u nành, hành, ti…. chúng chim
khong 1% protein tng s trong lá ca các loài thc vt này. HSP c tng hp
khi t bào gp iu kin cc oan nh: hn, nhit  cao,  mui cao. S xut hin
ca HSP có chc nng ngn cn hoc sa cha s phá y do stress nóng và m
rng giá tr ngng vi s chng chu nhit  cao. Trong các t bào thc vt HSP
t bào cht tp trung thành các ht sc nhit (HSG-Heat Shock Granules). Ngi ta
cho rng các HSP gn kt trên các ARN polymeraza  ngn cn s phiên mã tng
hp mARN trong quá trình b stress nóng. Sau sc nóng các ht này phân tán và
liên kt dày c vi các ribôxôm hot ng sinh tng hp protein [19].

Không có nhận xét nào:

Đăng nhận xét